[Член (365WT)]Адказы [Кітайскі ] | Час :2018-02-22 | З развіццём метадаў падзелу вадкасці высокай эфектыўнасці (ВЭЖХ) і Orbitrap (The Orbitrap) мас-спектраметрыі, вадкаснай храматаграфіі тандэмнай мас-спектраметрыі (ВХ-МС / МС) у цяперашні час дамінуючай тэхналогіяй пры аналізе пратэёміка. Асноўны этап ідэнтыфікацыі бялкоў (знізу ўверх), як правіла, паказанае на малюнку справа: ўзор сабранага пасля пераварвання агульнай бялковага экстракта → рэзкі → бялку ўяўляе сабой фрагмент поліпептыд падзелу ВЭЖХ фракцыянавання → далей у поле іянізацыі МС → атрымаць кожны іён масы для зарадкі MS → разлічыць суадносіны амінакіслотнага складу і выманне базы дадзеных праграмнае забеспячэнне → стаўленне пікавай інфармацыі і якаснай інфармацыю, атрыманыя бялковыя паслядоўнасці. Метады На аснове колькаснай пратэёміка LC-MS / MS, як правіла, дзеліцца на два віды без маркіроўкі і метадаў маркіроўкі часта выкарыстоўваюцца тыпаў маркіроўкі маюць:. ITRAQ (in vitro), TMT (in vitro), SILAC (у жывым арганізме) на аснове трох відаў ізатопа метад этыкетцы полуколичественный.У найбольш часта выкарыстоўваным iTRAQ колькаснай пратэёміка Прыкладу: iTRAQ складаецца з 8 (113/114/115/116/117/118/119/121) ізатопных метак кампазіцый, ферментатыўныя 8 выпадкаў былі розныя ўзорамі ў ходзе эксперыменту → да поліпептыд фрагментаў былі пазначаныя ізатопныя пазнакі → 8 відаў у васьмі выпадках добрага маркер полипептидной сумесі ўзору ў адным выпадку → агульнай пробы ў сістэму аналізу ОГО-МС / МС МС → дзве фазы балансу група iTRAQ нейтральная страта адбываецца пры нізкім генерацыі мноства справаздач іённай мас-вобласці → плошчу пікі была разлічана для кожных іёнаў рэпарцёра, каб атрымаць адноснае ўтрыманне тых жа пептыдных суадносін → ўзважаныя адрозненні паміж рознымі ўзорамі разлічваюцца для атрымання адноснага ўтрымання пептыдаў агульнага бялку колькаснага значэння.. ITRAQ тэхналогія прадстаўлена ў прабірцы тэхналогіі маркіроўкі ў цяперашні час найбольш шырока выкарыстоўваюцца полуколичественным пратэёміка выяўленне, прастата ў эксплуатацыі, высокая стабільнасць дадзеных. Тым не менш, па колькасці абмежаванняў маркіроўкі ізатопаў, вялікая колькасць узораў на працягу эксперыменту, каб пазнакі, свабодныя і А ў якасці прадстаўніка, які не пазначаючы тэхналогію колькаснай пратэёміка мае перавагу атрымання больш падрабязнай інфармацыі гл падстаронак.
http://www.wayenbio.com/danbaizhizuxue-316395-0-item-651757.html |
|